推荐一篇发表在ACS Central Science上的文章“Late-Stage Minimal Labeling of Peptides and Proteins for Real-Time Imaging of Cellular Trafficking”，文章的通讯作者是爱丁堡大学的Marc Vendrell和特拉维夫大学的Muhammad Jbara。在本文中，作者们发展了一种针对未受保护蛋白和肽的后期标记策略。
肽和蛋白的细胞摄取途径复杂多样，了解其机制对于以它们为中心的治疗方法有重要意义。因此有必要发展一种免洗与实时成像兼容的方式来了解其内化机制。小荧光氨基酸是一种有前途的为蛋白和肽引入荧光信号的方式，但此前使用的通过SPPS合成荧光氨基酸的方法受到了荧光基团降解的限制，通过密码子扩展方法的策略则需要复杂的遗传操作，因此有必要发展一种后期引入并且位点特异性的荧光基团引入策略，以制备小蛋白与肽的天然荧光类似物。
作者以苯并二唑荧光基团为基础研究了不同杂原子对于构建体的荧光信号影响，结果表明半胱氨酸连接噻二唑(Cys-SNBD)在水中具有最弱的背景信号，而在疏水环境下具有最强的荧光响应，可以用于肽段与蛋白的免洗荧光信号表征。随后作者设计了一种Pd催化的标记策略，可以在生理条件下高效稳定地将荧光基团标记到具有半胱氨酸的肽段或蛋白上。
随后作者将这一策略扩展到肽段和蛋白上，作者使用荧光基团标记了小鼠趋化因子配体2 （mouse chemokine ligand 2, mCCL2），用于研究其与在巨噬细胞内吞中的动态过程。这一蛋白可以在生理条件下短时间孵育得到其荧光类似物，并且可以无需任何洗涤步骤便用于检测其在巨噬细胞中的内吞过程，表明了这一策略在蛋白和肽上的泛用性。
总之，本文发展了一种为蛋白和肽段进行后期荧光标记的策略，将为蛋白和肽段成像以及药物内吞过程带来重要启发。
https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acscentsci.4c01249
原文引用：DOI：10.1021/acscentsci.4c01249
