BGC muf促进生物膜的产生。根据生信分析将先前收集的变形链球菌菌株分为8组，以葡萄糖作为碳源时第一组菌株中如Smu56和Smu57具有较强的生物膜形成能力（图1）。
第一组菌株同时含有BGC1和BGC2，在Smu56和Smu57中进行基因敲除以探究这两个BGC在生物膜形成中的可能作用。BGC1（muf）的敲除导致形成具有松散的海绵状结构的异常生物膜（图2a）。此外Δmuf突变体形成的生物膜可以通过轻摇去除（图2b）。Δmuf突变体在牙齿表面形成的生物膜显着减少（图2c），综上BGC muf在生物膜形成中发挥重要作用。
BGC muf通过增加细菌细胞表面疏水性从而促进粘附。水的接触角（θW）可以反映细菌的疏水性，数值越高疏水性越强。结果表明第一组菌株表面更加疏水，3个Δmuf突变体θW值均降低，说明BGC muf与细菌细胞表面疏水性相关（图3a）。细胞之间的相互作用强于每个细胞与水的相互作用，因此细菌细胞易于聚集被认为是疏水的。随后作者测定细胞表面张力参数和界面相互作用能，进一步证实细胞表面疏水性的增加促进粘附（图3b-c）。
鉴定muf代谢产物并解析生合成途径。接下来作者鉴定muf编码的代谢产物mutanofactin 1-5。NRPS/ PKS杂合途径负责mutanofactin的生物合成（图4）。
除了生合成关键酶NRPS-PKSs外，BGC muf还编码MufA （4'-磷酸泛肽基转移酶PPT），MufB（II型硫酯酶TE），MufC（转录调节因子）和MufH，-I和-J（ABC转运蛋白）（图4a）。ΔmufB和ΔmufC均降低5的产生，ΔmufHIJ较少损失5，表明MufH，-I和-J负责向细胞运输5（图5a）。5以浓度依赖的方式影响生物膜的形成和细菌的聚集（图5b-c）。将5添加到Δmuf突变体的回补实验表明以浓度依赖方式恢复生物膜的形成（图2a, c, 图5d）。此外5促进了相关缺乏muf BGC样品中生物膜的形成（图5e，f）。
一些小分子次级代谢产物，例如绿脓素，可与eDNA结合并促进eDNA介导的生物膜形成。有鉴于此，作者提出5促进生物膜形成的机制：经过生物合成并从链球菌分泌后，5与自身和邻近的链球菌结合，在细菌细胞周围形成表面层。疏水层增加细菌细胞表面疏水性，促进粘附以及随后的生物膜形成和生长。此外，5直接与eDNA结合并促进eDNA介导的细胞聚集和生物膜形成（图6）。
总之，本文作者发现NRPS/ PKS杂合途径生物合成的mutanofactin通过增加细菌的疏水性促进生物膜的形成。本文突显微生物次生代谢介导龋齿发展相关过程的重要性，为龋病的产生、预防和治疗相关研究提供参考。
