抗体-药物偶联物（ADC）是一类不断增长的化疗药物，在临床上取得了惊人的效果。然而，ADC的疗效往往受到与肿瘤异质性和耐药性相关问题的影响。为了克服这些问题，目前已经开发了新一代的ADC，是一种带有多个不同有效载荷的单克隆抗体，称为多有效载荷ADC。最近，University of Cambridge的Gonçalo J. L. Bernardes课题组通过多种正交位点特异性蛋白质修饰策略，以产生高度均匀的多功能抗体偶联物。

该研究对几种位点特异性蛋白质修饰策略在单个IgG支架上组合使用以形成多功能位点特异性抗体偶联物的能力进行了全面评估。首先，对六种显示出组合使用前景的策略进行了单独评估。将最稳健的方法结合起来，产生包含多种独特修饰的同质抗体偶联物。

图片来源：Angew. Chem. Int. Ed.

有趣的是，发现改造内部半胱氨酸的位置显著影响抗体表达产量和双功能抗体的生产产量，239iC暴露较少的位置相对于其他半胱氨酸突变体（A327C、T289C）提供了更高的产量。然后将这两种共轭策略与优化的分选酶和GALaXy介导的偶联方法，产生了具有四个独特修饰的抗体，这些修饰选择性地安装在四个不同的位点。重要的是，该抗体保留了其抗原结合特性。这是有效载荷计数大于2的同质多有效载荷ADC的第一个例子，从而促进了下一代ADC的开发。

图片来源：Angew. Chem. Int. Ed.

原文标题：Site-Specific Quadruple-Functionalised Antibodies

原文作者：Toby Journeaux, Michael B. Geeson, Thomas V. Murray, Monika A. Papworth, Matt Gothard, Jason G. Kettle, Aldrin V. Vasco, and Gonçalo J. L. Bernardes*

Angew. Chem. Int. Ed. 2024, e202417620